Сравнение состояний мутаций рецепторов эпидермального фактора роста в тканях и плазме у пациентов с немелкоклеточным раком легких I-IV стадии

  1. Аннотация Предпосылки: Мутации рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) играют существенную...
  2. Материал и Методы
  3. Экстракция ДНК
  4. ME-PCR анализ мутаций EGFR в экзонах 19 и 21
  5. Обнаружение удаления экзона 19
  6. Обнаружение мутации L858R
  7. Статистический анализ
  8. Результаты
  9. Таблица 1
  10. Анализы чувствительности
  11. Скорости мутации EGFR в тканях и плазме
  12. Таблица 2
  13. Корреляция мутационного статуса EGFR в образцах ткани и плазмы
  14. Таблица 3
  15. Согласованность, чувствительность и специфичность, достигнутые с использованием плазмы и связанных...
  16. Таблица 4
  17. обсуждение
  18. Таблица 5
  19. Подтверждения
  20. Раскрытие финансовой информации и конфликт интересов
  21. Рекомендации
  22. Детали статьи / публикации
  23. Авторское право / Дозировка наркотиков / Отказ от ответственности

Аннотация

Предпосылки: Мутации рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) играют существенную роль в лечении немелкоклеточного рака легкого (NSCLC) с использованием ингибиторов тирозинкиназы EGFR. Обнаружение мутаций EGFR в бесклеточной ДНК (cfDNA) крови представляется многообещающим. Однако мутационный статус в плазме / сыворотке не всегда согласуется с таковым в тканях. Цели: Целью данного исследования было сравнить состояния мутаций в плазме с таковыми в тканях и, таким образом, определить конкретные подгруппы пациентов с NSCLC, которые могут быть лучшими кандидатами для анализа мутации EGFR с использованием cfDNA крови. Методы. Всего было отобрано 111 пар образцов ткани и плазмы. Мутантно-обогащенные ПЦР и секвенирующие анализы были выполнены для выявления EGFR экзонов 19 делеций и экзонов 21 L858R мутаций. Результаты: мутации были обнаружены у 43,2% (48/111) пациентов. Общий уровень согласованности состояний мутации EGFR для 111 парных образцов плазмы и тканей составил 71,2% (79/111). Чувствительность и специфичность выявления мутаций EGFR в плазме составляли 35,6% (16/45) и 95,5% (63/66) соответственно. Стадия заболевания и подгруппы дифференцировки опухоли показали значительно различную чувствительность обнаружения; чувствительность составила 10% у пациентов на ранней стадии и 56% у пациентов на поздней стадии (р = 0,0014). Для пациентов с низкодифференцированными опухолями чувствительность составила 77,8%, что значительно отличалось от пациентов с высокодифференцированными (20%; р = 0,0230) и умеренно дифференцированными опухолями (19%; р = 0,0042). Заключение. Анализ крови на мутации EGFR может быть эффективно использован у пациентов на поздней стадии или у пациентов с плохо дифференцированными опухолями.

© 2012 S. Karger AG, Базель

Вступление

Мутации, активирующие рецептор эпидермального фактора роста (EGFR), играют существенную роль в лечении немелкоклеточного рака легкого (NSCLC) с использованием ингибиторов тирозинкиназы EGFR (TKIs) [ 1 , 2 , 3 ]. Обнаружение мутаций EGFR в ткани считается золотым стандартом в прогнозировании ответов и прогнозов лечения TKI. К сожалению, образцы тканей иногда ограничены [ 4 ]. Повышенные уровни бесклеточной ДНК (cfDNA) в плазме или сыворотке крови у пациентов с раком легких ранее были описаны в литературе [ 5 , 6 , 7 ]. Однако механизмы, связанные с cfDNA, еще не выяснены. Возможно, что опухолевая ДНК высвобождается в кровоток через апоптоз или некроз клеток [ 8 ]. Однако было обнаружено, что обнаружение мутаций EGFR в cfDNA возможно у пациентов с NSCLC. Кимура и соавт. [ 9 ] впервые сообщили о полезности cfDNA для скрининга мутаций EGFR и о высокой степени согласованности ответных реакций лечения на TKI. К сожалению, статусы мутации EGFR в плазме и / или сыворотке не всегда соответствовали таковым в тканях. Хотя использование плазмы для выявления мутаций EGFR было подтверждено, лишь в нескольких исследованиях сообщалось о связи между последовательностью обнаружения и группировкой пациентов в соответствии с их клиническими характеристиками. Идентификация подгрупп, которые имеют более высокие согласованные статусы мутации EGFR как в плазме, так и в тканях, позволила бы отобрать обогащенные популяции для тестирования мутации EGFR в крови.

Приблизительно 30 активирующих мутаций в экзонах 18–21 гена EGFR были зарегистрированы [ 1 , 2 , 10 , 11 ]. Внутрикадровые делеции экзона 19 и точечная мутация, заменяющая лейцин аргинином в кодоне 858 в экзоне 21, обычно наблюдаются при NSCLC; на эти мутации приходится 90% мутаций, что может объяснить драматические реакции на гефитиниб и / или эрлотиниб [ 11 , 12 , 13 , 14 ]. В этом исследовании делеции экзона 19 EGFR и мутации L858R экзона 21 в образцах парной ткани и плазмы анализировали с помощью обогащенной мутантами ПЦР (ME-PCR).

Цели данного исследования состояли в том, чтобы сравнить мутационные состояния в плазме с таковыми в тканях и, таким образом, определить конкретные подгруппы пациентов, которые могут быть лучшими кандидатами для анализа мутации EGFR с использованием cfDNA крови.

Материал и Методы

Пациенты и материалы

В этом исследовании были зарегистрированы пациенты с NSCLC, которым с декабря 2008 года по сентябрь 2010 года был поставлен новый диагноз в отделении респираторных заболеваний Медицинской больницы Пекинского союза и в отделении торакальной хирургии Народной больницы Пекинского университета с имеющимися образцами тканей и крови. Все образцы были собраны из остатков клинических диагнозов. Исследование было одобрено Инспекционным советом больницы медицинского колледжа Пекинского союза. Письменное информированное согласие было получено от всех пациентов.

В общей сложности 111 пар фиксированных формалином, залитых парафином образцов ткани и крови были взяты из больницы Медицинского колледжа Пекинского союза и Народной больницы Пекинского университета до лечения пациентов. Образцы тканей были получены с помощью трансбронхиальной / чрескожной биопсии (58) и различных операций (53). Все образцы ткани были подвергнуты гистологическому исследованию патологами из больницы Медицинского колледжа Пекинского Союза, чтобы подтвердить диагнозы NSCLC, и соответствующие образцы плазмы также были собраны. Для каждого пациента 200 мкл плазмы собирали и хранили при -80 ° C до использования. Интервал между сбором ткани и образцом парной крови составлял менее 1 недели.

Экстракция ДНК

Фиксированные формалином, погруженные в парафин ломтики депарафинизировали в ксилоле и регидратировали в нисходящих сортах этанола. ДНК экстрагировали с использованием набора Magnetic Genomic DNA Kit (Tiangen Biotech, Пекин, Китай) в соответствии с протоколом производителя. Концентрации ДНК определяли количественно с использованием NanoDrop ND-1000 (NanoDrop Technologies, Rockland, Del., USA). Извлеченную ДНК хранили при -20 ° С до использования.

ME-PCR анализ мутаций EGFR в экзонах 19 и 21

ME-PCR является высокочувствительным анализом для выявления мутаций EGFR [ 15 ]. В этом исследовании мы следовали методологии Asano et al. [ 15 ] с некоторыми изменениями.

Обнаружение удаления экзона 19

Последовательности праймеров для первичной амплификации ПЦР были следующими: 5'-ATCCCAGAAGGTGAGAAAGATAAAATTC-3 '(прямой праймер, 19F1) и 5'-ACATTTAGGATGTGGAGATGAGCAG-3' (обратный праймер, 19R1). В этом анализе первый цикл амплификации проводили в течение 20 циклов (30 с при 95 ° С, 30 с при 60 ° С и 30 с при 72 ° С в течение 5 циклов, затем 30 с при 95 ° С, 30 с при 55 ° C и 30 с при 72 ° C в течение 15 циклов) с использованием 5–100 нг образца ДНК, 5 пмоль каждого праймера и 3 мкл GoTaq Colorless Master Mix (Promega, Valencia, CA, USA). Мы использовали Mse I ( NEB , Пекин, Китай) для расщепления последовательности TTAA дикого типа в экзоне 19. Поскольку последовательность TTAA расположена на 26 основаниях выше по течению от первой буквы кодона 747, который также встречается в мутантных генах, прямой Праймер с несовпадением был разработан для создания последовательности с 1 несовпадающим основанием (ATAA, T to A) в этом сайте, чтобы предотвратить расщепление Mse I в месте присоединения праймера в ампликоне. Прерывистое рестрикционное расщепление 1 мкл первого продукта ПЦР проводили с использованием 2,5 МЕ Mse I при 37 ° С в течение 4 часов. После расщепления из раствора на 20 мкл отбирали аликвоту по 2 мкл для использования в качестве матрицы для второго раунда амплификации ПЦР в течение 40 циклов (30 с при 95 ° С, 30 с при 60 ° С и 30 с при 72 ° С). Вложенные прямой и обратный праймеры для второго раунда были следующими: 5'-AGGTGAGAAAGATAAAATTCCCGTC-3 '(прямой праймер, 19F2) и 5'-GAGATGAGCAGGGTCTAGAGCAG-3' (обратный праймер, 19R2).

Обнаружение мутации L858R

Анализ L858R был по существу таким же, как и анализ экзона 19, за исключением праймеров и рестриктазы. Были использованы две пары вложенных праймеров. Последовательности были следующими: 5'-TCAGAGCCTGGCATGAACATGACCCTG-3 ′ (прямой праймер, 21F1) и 5′-GGTCCCTGGTGTCAGGAAAATGCTGG-3 ′ (обратный праймер, 21R1), а также 5'-CAGCAGGGTCTTCTCTGTTT-3TC, TGTTTC-TTCTGTTTC-3 ′, 5 ′, праймер 5 и 2'-праймер 5 ′, праймер 5 и 2'TTTCTCTGTTTC-3 'и 5'-праймер 5' ′, праймер 5 и 2'T 5TCTGTTTC 3 ′ -GAAAATGCTGGTGACCTAAAG-3 ′ (обратный праймер, 21R2). Я был использован для переваривания гена дикого типа. Протоколы ПЦР-амплификации и рестрикционного расщепления для экзона 21 были такими же, как и для экзона 19.

Каждый образец амплифицировали в трех независимых реакциях ПЦР. Продукты второй амплификации очищали и секвенировали (в обратной ориентации для экзона 19 и в прямой и обратной ориентациях для экзона 21) с помощью Invitrogen (Шанхай, Китай) или Sangon Biotech (Шанхай, Китай) Co., Ltd. Последовательности сравнивали с заархивированной в GenBank последовательностью EGFR человека (инвентарный номер AY588246) и считывали два исследователя независимо. В случаях разногласий третий наблюдатель также провел анализ и принял окончательное решение. Лабораторные данные были получены и зарегистрированы независимыми исследователями, которые были слепы к клиническим данным, пока статистик не провел анализ.

Статистический анализ

Для анализа данных использовалось статистическое программное обеспечение SAS, версия 9.0 (Институт SAS, Кэри, Северная Каролина, США). Тест Макнемара был использован для оценки значимости разницы между показателями выявления мутаций в образцах ткани и плазмы. Степень согласия была измерена с помощью теста Каппа. Мутации EGFR в образцах тканей считались золотым стандартом для измерений чувствительности и специфичности. Все категориальные переменные были проанализированы с помощью критерия χ2 или точного критерия Фишера. Значение р менее 0,05 считалось статистически значимым.

Результаты

Клинические характеристики пациента

Клинические характеристики пациентов сведены в таблицу 1 , Из 111 пациентов, которые были включены в это исследование, 35 были женщины и 76 были мужчины, со средним возрастом 59 лет (диапазон 27–87 лет). Было 57 когда-либо курящих и 54 никогда не курящих. Статус курения основывался на записях первых посещений пациентов в клинике, а постоянный курильщик определялся как человек, который за свою жизнь выкурил более 100 сигарет. Стадия заболевания определялась в соответствии с 7-м изданием классификации злокачественных опухолей TNM [ 16 ]. Двадцать два пациента были классифицированы как стадия I, 10 как стадия II, 33 как стадия III и 46 как стадия IV. Гистологические типы были определены в соответствии с 3-й Всемирной организацией здравоохранения / Международной ассоциацией по изучению рака легких, при этом 73 были классифицированы как аденокарциномы, 35 - как плоскоклеточный рак и 3 - как другие типы НМРЛ. Из 111 образцов ткани 20 были высоко дифференцированы, 45 - умеренно дифференцированы, 34 - плохо дифференцированы, а 12 не могли быть оценены.

Таблица 1

Характеристика пациентов с НМРЛ до лечения

Характеристика пациентов с НМРЛ до лечения

Анализы чувствительности

Мы сконструировали ряд геномной ДНК с мутантными градиентами ДНК, используя ДНК, выделенную из трех клеточных линий A549 (дикого типа), H1975 (L858R) и H1650 (del746–750). Концентрация, которая использовалась для серии, составляла 60 нг / мкл. Этот анализ показал, что ME-PCR был способен обнаружить мутантную молекулу, которая присутствовала на фоне последовательностей дикого типа в пропорции 0,2%. Мутантная ДНК не может быть обнаружена в пропорции менее 0,2%, но она все же может быть обнаружена, даже если матрица была разбавлена ​​до 5 нг / мкл при 0,2%.

Скорости мутации EGFR в тканях и плазме

Таблица 2 показывает мутации EGFR, которые были обнаружены в тканях и плазме. Сорок пять образцов ткани (40,5%) и 19 образцов плазмы (17,1%) имели мутации EGFR. Среди пациентов с мутациями EGFR в образцах их тканей 52% имели делеции 19 экзона, а 48% имели мутации L858R. Из пациентов с мутациями EGFR в плазме 55% имели делеции 19 экзона и 45% имели мутации L865R. Один пациент имел мутации экзона 19 и 21 в образцах ткани и плазмы.

Таблица 2

Резюме мутаций EGFR в образцах тканей и плазмы

Резюме мутаций EGFR в образцах тканей и плазмы

Корреляция мутационного статуса EGFR в образцах ткани и плазмы

Из 111 парных образцов 79 имели одинаковый статус мутации EGFR в тканях и плазме. Три образца плазмы дали положительный результат на мутации EGFR, но показали отрицательные результаты в парных образцах ткани, тогда как 29 были положительными в тканях, но отрицательными в образцах плазмы. Частота мутаций в тканях и плазме значительно различалась, как оценивали по критерию Макнемара (χ2 = 21,125, р <0,001). Степень согласия для тестирования мутаций EGFR в тканях и плазме оказалась слабой с помощью теста Каппа, который показал коэффициент 0,342 [95% доверительный интервал (ДИ) 0,182–0,501]. Корреляции между мутациями, обнаруженными в тканях и плазме, приведены в таблице. 3 ,

Таблица 3

Корреляция мутаций EGFR в парных тканях и образцах плазмы

Корреляция мутаций EGFR в парных тканях и образцах плазмы

Согласованность, чувствительность и специфичность, достигнутые с использованием плазмы и связанных с ней характеристик пациента

Общая согласованность состояний мутации EGFR в 111 парных образцах плазмы и ткани составила 71,2%. Чувствительность и специфичность составили 35,6 и 95,5% соответственно. Мы проанализировали последовательность, чувствительность и особенности пола, возраста, истории курения, стадии заболевания, патологии и дифференцировки опухоли. Высокая общая согласованность была продемонстрирована подгруппами пациентов с плохо дифференцированными опухолями (91,2%, 95% ДИ 79–98%; р = 0,0053) и плоскоклеточным раком легкого (91,4%, 95% ДИ 77–98%; р = 0,0014). Чувствительность значительно различалась в стадии заболевания и подгруппе патологической дифференцировки. Чувствительность составила 10% (95% ДИ 1–32%) у пациентов на ранней стадии и 56% (95% ДИ 35–76%) у пациентов на поздней стадии (р = 0,0014). Для пациентов с низкодифференцированными опухолями общая чувствительность составила 77,8% (95% ДИ 40–97%), что было значительно выше, чем у пациентов с высокодифференцированной (20%, 95% ДИ 3–56%; p = 0,0230). ) и умеренно дифференцированные опухоли (19%, 95% ДИ 5–42%; р = 0,0042). Таблица 4 показывает анализ последовательности, чувствительности и специфичности подгруппы.

Таблица 4

Корреляция между мутациями EGFR и клиническими характеристиками

Корреляция между мутациями EGFR и клиническими характеристиками

обсуждение

Разработка неинвазивного метода генного скрининга у онкологических больных является многообещающей. Однако мутационные состояния в плазме / сыворотке не всегда согласуются с таковыми в тканях. Соответствия между состояниями мутации EGFR в тканях и образцами плазмы / сыворотки в предыдущих исследованиях варьировались от 58 до 97% и перечислены в таблице. 5 , Мы предполагаем, что отбор конкретных пациентов позволит оптимизировать согласованность результатов.

Таблица 5

Обзор исследований по оценке выявления мутаций EGFR в сыворотке или плазме

Обзор исследований по оценке выявления мутаций EGFR в сыворотке или плазме

В нашем исследовании общая согласованность составила 71,2%. Мы проанализировали последовательность и чувствительность различных подгрупп пациентов. Консистенция была значительно выше при плоскоклеточном раке (91,4%; р = 0,0014) и слабо дифференцированных подгруппах NSCLC (91,2%; р = 0,0053). В подгруппе сквамозных клеток высокая консистенция была обусловлена ​​низкой общей частотой мутаций (5,7%). Из 35 пациентов с плоскоклеточным раком легких только 2 имели мутации EGFR, и они были обнаружены только в образцах ткани, но не в плазме в обоих случаях. Поскольку целью обнаружения неинвазивных мутаций EGFR является эффективное обнаружение положительных результатов, мы проанализировали чувствительность обнаружения в подгруппах, основанных на характеристиках пациентов. Примечательно, что чувствительность значительно варьировалась в зависимости от стадии заболевания и патологической дифференциации; оно составляло 10% на ранней стадии, 56% на поздней стадии, 20% у высокодифференцированных пациентов и 19% в умеренно дифференцированной подгруппе, но достигло 77,8% в слабо дифференцированной подгруппе. Разумно предположить, что мутации EGFR, которые наблюдаются в cfDNA, в большей степени согласуются с мутациями в тканях пациентов с поздней стадией и слабо дифференцированным NSCLC. Предыдущее исследование показало, что доля опухолевой cfDNA варьируется в зависимости от состояния и размера опухоли [ 8 ]. Кроме того, плохо дифференцированные опухоли обычно агрессивны и обладают высоким потенциалом метастазирования. Следовательно, пропорции производной от опухоли cfDNA могут быть выше у пациентов с поздней стадией и плохо дифференцированным NSCLC. Исследование, оценивающее пациентов IV стадии из Испании, показало высокий уровень согласованности (98,3%) у пациента с состоянием работоспособности (PS) 2 [ 17 ]. Мы не анализировали взаимосвязь согласованности или чувствительности с PS в этом исследовании, потому что большинство пациентов были классифицированы как PS 0–1.

В подгруппах, которые показали несоответствия, мутации были обнаружены либо в тканях, либо в плазме. Многие гипотезы и объяснения этого были предложены. Большое количество cfDNA, которое происходит из нераковых тканей, может привести к ложным негативам в плазме / сыворотке [ 8 ]. Принимая во внимание небольшую долю cfDNA, полученной из рака, могут применяться высокочувствительные методы, такие как ME-PCR, амплифицированная Scorpion система рефрактерной мутации и денатурирующая ВЭЖХ. В этом исследовании ME-PCR и секвенирование были использованы для выявления мутаций EGFR. Однако, хотя чувствительность определения ME-ПЦР достигала 0,2%, в плазме можно было обнаружить только 40,5% (16/45) мутантной ДНК, полученной из опухоли. Примечательно, что несколько предыдущих исследований показали, что мутации EGFR присутствовали в плазме, но не в тканях. В нашем исследовании мы обнаружили мутации EGFR в 3 образцах плазмы, но не в парных тканях. Для этих образцов ткани 1, который был взят из метастатической биопсии лимфатического узла, содержал значительную часть лимфоцитов, которые могли влиять на генотипирование. Другие 2 были получены из трансбронхиальной биопсии, которая, возможно, не предоставила достаточного материала для выяснения полного генетического состава опухолей. Следовательно, для этих 3 пациентов, возможно, результаты секвенирования опухоли были ложно отрицательными.

Из 51 пациента на ранней стадии мутации EGFR присутствовали в 20 образцах ткани, но только в 3 образцах плазмы. У одного из этих 3 пациентов была слабо дифференцированная аденокарцинома фазы IIIA, а у других 2 пациентов была фаза I, у одного из которых была умеренно дифференцированная аденокарцинома, а у другого плохо дифференцированный плоскоклеточный рак легкого. Ранее только одно исследование мутаций EGFR в плазме / сыворотке использовало пациентов на ранней стадии. В этом исследовании мутации EGFR были обнаружены в 15 из 50 образцов ткани; однако мутации не были обнаружены в образцах плазмы [ 18 ].

Результаты этого исследования подтверждают гипотезу о том, что использование образцов крови может быть широко применимо для опухолей с соматическими мутациями, включая EGFR, K-RAS, BRAF, HER2 и PIK3CA, для которых целевые препараты доступны или находятся в стадии разработки. Кроме того, молекулярная характеристика периферической крови может обеспечить стратегию неинвазивного последовательного мониторинга генотипов опухоли во время лечения, особенно для мутации EGFR T790M, которая является вторичной мутацией, которая связана с приобретенной устойчивостью к EGFR-TKI [ 19 ]. Существуют некоторые ограничения, рассматривающие настоящий анализ как ретроспективное исследование. Только 111 пациентов были включены в исследование. Размер выборки, особенно для бедной подгруппы дифференциации, недостаточно велик, чтобы прийти к более определенному заключению. Если проводится проспективное исследование, необходимо учитывать потребность в достаточном количестве плазмы / сыворотки, подходящих методов выделения ДНК и адекватных размеров выборки.

Таким образом, текущее исследование демонстрирует, что ДНК плазмы может быть жизнеспособной альтернативой образцам опухолей для выявления мутаций EGFR, и это наиболее эффективно применяется у пациентов с поздней стадией или плохо дифференцированным NSCLC. Таким образом, наши результаты являются многообещающими, хотя они требуют дальнейшей оценки, поскольку они указывают на полезность крови для анализа генов.

Подтверждения

Мы благодарим профессора Вэй-Цзян Ху (Китайский центр по контролю и профилактике заболеваний) за его вклад в статистический анализ. Исследование было поддержано Медицинским колледжем Пекинского союза.

Раскрытие финансовой информации и конфликт интересов

Там нет конфликта интересов, чтобы раскрыть.

Рекомендации

  1. Линч Т.Дж., Белл Д.У., Сорделла Р., Гурубхагаватула С., Окимото Р.А., Бранниган Б.В., Харрис П.Л., Хазерлат С.М., Супко Д.Г., Халуска Ф.Г., Луи Д.Н., Кристиани Д.К., Сеттлман Д., Хабер Д.А .: Активация мутаций в рецепторе эпидермального фактора роста лежащая в основе реакции немелкоклеточного рака легкого на гефитиниб. N Engl. J Med 2004; 350: 2129–2139.
  2. Паез Дж. Г., Джанн П., Ли Дж. К., Трейси С., Грейлих Х., Габриэль С., Герман П., Кей Ф. Дж., Линдеман Н., Боггон Т. Дж., Наоки К., Сасаки Х, Фуджи Й, Эк М.Дж., Селлерс В. Р., Джонсон Б. Э., Мейерсон М. : Мутации EGFR при раке легкого: корреляция с клиническим ответом на терапию гефитинибом. Science 2004; 304: 1497-1500.
  3. Wojas-Krawczyk K, Krawczyk P, Mlak R, Kucharczyk T, Kowalski DM, Krzakowski M, Milanowski J: Применимость прогностического индекса для лечения второй и третьей линии невыделенных немелкоклеточных пациентов с раком легкого. Дыхание 2011; 82: 341–350.
  4. Коста Д.Б., Кобаяши С., Тенен Д.Г., Хуберман М.С.: Объединенный анализ проспективных испытаний монотерапии гефитинибом для немелкоклеточного немелкоклеточного рака легких с EGFR. Рак легких 2007; 58: 95–103.
  5. Пачи М, Марамотти С, Беллезия Е, Формисано Д, Альбертацци Л, Ричкетти Т, Феррари Г, Аннесси В, Лазаньи Д, Карбонелли С, Де Франко С, Брини М, Сгарби Г, Лоди Р, Сирера Р, Бремнес Р.М., Кабрера A, Jantus-Lewintre E, Sanmartin E, Blasco A, Del Pozo N, Rosell R, Guijarro R, Galbis J, Sanchez JJ, Лагеря C, Ye L, Ma GH, Чэнь L, Ли М, Лю JL, Ян К, Li QY, Li N, Wan HY: циркулирующая плазменная ДНК в качестве диагностического биомаркера в циркулирующей ДНК немелкоклеточного рака легкого является полезным прогностическим фактором у пациентов с прогрессирующим немелкоклеточным раком легкого, количественное определение циркулирующей бесклеточной ДНК в сыворотке крови пациенты с синдромом обструктивного апноэ-гипопноэ во сне. Рак легких 2009; 64: 92–97.
  6. Сирера Р., Бремнес Р., Кабрера А., Янтус-Левинтр Е., Санмартрин Е., Бласко А., Дель Позо Н., Розелл Р., Гихарро Р., Гальбис Д., Санчес Дж.Дж., лагеря С: циркулирующая ДНК является полезным прогностическим фактором у пациентов с продвинутой стадией немелкоклеточный рак легкого. J Thorac Oncol 2011; 6: 286-290.
  7. Е.Л., Ма Г.Х., Чен Л., Ли М., Лю Ю.Л., Ян К., Ли К.Ю., Ли Н., Ван Г.Ю. Количественное определение циркулирующей бесклеточной ДНК в сыворотке пациентов с синдромом обструктивного апноэ-гипопноэ во сне. Lung 2010; 188: 469–474.
  8. Jahr S, Hentze H, Englisch S, Hardt D, Fackelmayer FO, Hesch RD, Knippers R: фрагменты ДНК в плазме крови у больных раком: количественные данные и доказательства их происхождения из апоптических и некротических клеток. Cancer Res 2001; 61: 1659-1665.
  9. Кимура Х, Касахара К, Каваиси М, Кунито Х, Тамура Т, Холлоуэй Б, Нишио К: Обнаружение мутаций рецептора эпидермального фактора роста в сыворотке крови как предиктор ответа на гефитиниб у пациентов с немелкоклеточным раком легкого. Clin Cancer Res 2006; 12: 3915–3921.
  10. Хан С.В., Ким Т.Ю., Хван П.Г., Чон С., Ким Дж, Чой И.С., О, Д.Ю., Ким Дж.Х., Ким Д.В., Чунг Д.Х., Им С.А., Ким Й.Т., Ли Дж.С., Хео Д.С., Банг Ю.Дж., Ким Н.К .: Предсказательный и Прогностическое влияние мутации рецептора эпидермального фактора роста у немелкоклеточных больных раком легкого, получавших гефитиниб. J Clin Oncol 2005; 23: 2493-2501.
  11. Косака T, Yatabe Y, Endoh H, Kuwano H, Takahashi T, Mitsudomi T: Мутации гена рецептора эпидермального фактора роста при раке легкого: биологические и клинические последствия. Cancer Res 2004; 64: 8919–8923.
  12. Мок Т.С., Ву Й.Л., Тхонгпрасерт С, Ян Ч., Чу Д.Т., Сайджо Н., Сунпэравравонг П, Хань Б., Маргоно Б, Ичинозе Й., Нишиваки Й., Охе Ю., Ян Д.Дж., Чеваскуйонг Б, Цзян Х, Даффилд Э.Л., Уоткинс К.Л. , Броня А.А., Фукуока М: Гефитиниб или карбоплатин-паклитаксел при аденокарциноме легких. N Engl J Med 2009; 361: 947–957.
  13. Мамондо М, Иноуэ А, Кобаяши К, Сугавара С, Оидзуми С, Исобе Х, Джемма А, Харада М, Йошизава Х, Киношита I, Фудзита Y, Окинага С, Хирано Х, Йошимори К, Харада Т, Огура Т, Андо М , Миядзава Х, Танака Т, Сайджо Й, Хагивара К, Морита С, Нукива Т: Гефитиниб или химиотерапия немелкоклеточного рака легкого с мутированным egfr. N Engl J Med 2010; 362: 2380-2388.
  14. Чжоу С, Ву ЙЛ, Чэнь Г, Фэн Дж, Лю XQ, Ван С, Чжан С, Ван Дж, Чжоу С, Рен С, Лу С, Чжан Л, Ху С, Ху С, Ло Й, Чэнь Л, Е М , Хуан Дж, Чжи X, Чжан Y, Сю Q, Ma J, You C: Эрлотиниб в сравнении с химиотерапией в качестве терапии первой линии для пациентов с прогрессирующим мутационным EGFR немелкоклеточным раком легкого (OPTIMAL, CTONG-0802): многоцентровое открытое рандомизированное исследование фазы 3. Lancet Oncol 2011; 12: 735–742.
  15. Асано Х, Тойока С., Токумо М, Ишимура К, Аоэ К, Ито С, Цукуда К, Учида М, Аое М, Катаяма Х, Хираки А, Суги К, Киура К, Дата Н, Симидзу N: Обнаружение мутации гена EGFR при раке легкого методом мутантно-обогащенной полимеразной цепной реакции. Clinical Cancer Res 2006; 12: 43–48.
  16. Собин Л.Х., Господарович М.К., Виттекинд C: Классификация злокачественных опухолей TNM, изд. 7. Оксфорд, Wiley-Blackwell, 2009.
  17. Моран М.Т., Санчес Дж.М., Исла Д., Кобо М., Паз-Арес Л., Катот С., Хименес У, Диз П, Тарон М., Розелл Р.: Высокое соответствие между мутациями EGFR в ткани и в циркулирующей ДНК из немелкоклеточного легкого больные раком (NSCLC) (P) с плохим состоянием (PS). J Thorac Oncol 2007; 2: S444.
  18. Рен Дж, Сонг Г.Х., Чжан Л.Дж., Ди Л.Дж., Юань Й.Х., Ю Дж., Цзя Дж .: Низкое соответствие мутаций EGFR в опухолевой ткани и парной сыворотке пациентов с немелкоклеточным раком легкого. Chin J Cancer Res 2010; 22: 27–31.
  19. Kuang Y, Rogers A, Yeap BY, Wang L, Makrigiorgos M, Vetrand K, Thiede S, Distel RJ, Janne PA: Неинвазивное обнаружение EGFR T790M при немелкоклеточном раке легких, резистентном к гефитинибу или эрлотинибу. Clin Cancer Res 2009; 15: 2630–2636.
  20. Бай Х, Мао Л, Ван Х.С., Чжао Дж., Ян Л, Ан Т.Т., Ван Х, Дуан С.Дж., Ву Н.М., Го Цюй, Лю YX, Лю Х.Н., Ван Й.Ю., Ван Дж. Мутации рецептора эпидермального фактора роста в плазменной ДНК образцы предсказывают реакцию опухоли у китайских пациентов с немелкоклеточным раком легких стадий IIIB-IV. J Clin Oncol 2009; 27: 2653-2659.
  21. Goto K, Ichinose Y, Ohe Y, Yamamoto N, Negoro S, Nishio K, Itoh Y, Jiang H, Даффилд E, McCormack R, Saijo N, Mok T, Fukuoka M: Статус мутации рецептора эпидермального фактора роста в циркулирующей свободной ДНК в сыворотка: из IPASS, исследование III фазы гефитиниба или карбоплатина / паклитаксела при немелкоклеточном раке легкого. J Thorac Oncol 2012; 7: 115–121.
  22. Кимура Х, Суминое М, Касахара К, Соне Т, Арайя Т, Тамори С, Коидзуми Ф, Нишио К, Миямото К, Фуджимура М, Накао С: оценка состояния мутации рецептора эпидермального фактора роста в сыворотке ДНК как предиктор ответа на гефитиниб (IRESSA). Br J Cancer 2007; 97: 778–784.
  23. Юнг Т.К., Чан К.С., Мок Т.С., Тонг Дж., То К.Ф., Ло Ю.М.: Обнаружение в молекуле мутаций рецепторов эпидермального фактора роста в плазме с помощью микрофлюидной цифровой ПЦР у немелкоклеточных больных раком легкого. Clin Cancer Res 2009; 15: 2076–2084.
  24. Brevet M, Johnson ML, Azzoli CG, Ladanyi M: Обнаружение мутаций EGFR в плазменной ДНК у пациентов с раком легкого с помощью масс-спектрометрического генотипирования позволяет прогнозировать состояние EGFR опухоли и реакцию на ингибиторы EGFR. Рак легких 2011; 73: 96–102.
  25. He C, Лю М., Чжоу С., Чжан Дж., Оуян М., Чжун Н., Сюй Дж. Обнаружение мутаций рецептора эпидермального фактора роста в плазме с помощью мутантного ПЦР-анализа для прогнозирования ответа на гефитиниб у пациентов с немаленьким клеточный рак легких. Int J Cancer 2009; 125: 2393–2399.
  26. Кимура Х, Касахара К, Шибата К, Соне Т, Йошимото А, Кита Т, Итикава Y, Васеда Y, Ватанабэ К, Сиарасаки Х, Ишиура Y, Мидзугути М, Накацуми Й, Кашии Т, Кобаяси М, Кунитох Х, Тамура , Nishio K, Fujimura M, Nakao S: EGFR мутация опухоли и сыворотки у пациентов, получавших гефитиниб, с немелкоклеточным раком легкого, не получающим химиотерапию. J Thorac Oncol 2006; 1: 260–267.

Контакты автора

Мэн Чжао Ванг, доктор медицины

1 Шуай Фу Юань

Пекин 100730 (Китай)

Телефон +86 10 6915 5029

Электронная почта [email protected]

Детали статьи / публикации

Предварительный просмотр первой страницы

Предварительный просмотр первой страницы

Получено: 14 ноября 2011 г.
Принят: 10 апреля 2012
Опубликовано онлайн: 10 июля 2012 г.
Дата выпуска: февраль 2013

Количество печатных страниц: 7
Количество цифр: 0
Количество столов: 5

ISSN: 0025-7931 (Распечатать)
eISSN: 1423-0356 (Онлайн)

Для дополнительной информации: https://www.karger.com/RES

Авторское право / Дозировка наркотиков / Отказ от ответственности

Авторское право: все права защищены. Никакая часть этой публикации не может быть переведена на другие языки, воспроизведена или использована в любой форме или любыми средствами, электронными или механическими, включая фотокопирование, запись, микрокопирование или любую систему хранения и поиска информации, без письменного разрешения издателя. ,
Дозировка лекарств. Авторы и издатель приложили все усилия для обеспечения того, чтобы выбор лекарств и дозировка, изложенные в этом тексте, соответствовали текущим рекомендациям и практике на момент публикации. Однако, учитывая текущие исследования, изменения в правительственных постановлениях и постоянный поток информации, касающейся лекарственной терапии и реакций на наркотики, читателю настоятельно рекомендуется проверять вкладыш в упаковку для каждого лекарства на предмет любых изменений в показаниях и дозировке, а также на наличие дополнительных предупреждений. и меры предосторожности. Это особенно важно, когда рекомендуемый агент является новым и / или редко используемым лекарством.
Отказ от ответственности: заявления, мнения и данные, содержащиеся в этой публикации, принадлежат исключительно отдельным авторам и авторам, а не издателям и редакторам. Появление рекламных объявлений и / или ссылок на продукты в публикации не является гарантией, одобрением или одобрением рекламируемых продуктов или услуг или их эффективности, качества или безопасности. Издатель и редактор (ы) не несут ответственности за любой ущерб, нанесенный людям или имуществу в результате любых идей, методов, инструкций или продуктов, упомянутых в содержании или рекламе.

Похожие

Диагностика и лечение обструкции эякуляторного протока при мужском бесплодии
... илцилер М. · Килцилер М. · Тахмаз Л. · Тахмаз Л. · Кибар Ю. · Кибар Ю. Авторская принадлежность Кафедра урологии, Военно-медицинская академия им. Гюльхане, Анкара, Турция Для просмотра полного текста, пожалуйста, войдите Для просмотра PDF, пожалуйста, войдите купить Полный текст и PDF Неограниченный повторный доступ через MyKarger Неограниченная печать, без сохранения ограничений для
Оптимизация выбора способа герниопластики паховых грыж
резюме Цель - разработать алгоритм выбора способа герниопластики у пациентов с паховыми грыжами на основе анализа патологических изменений, которые возникли в результате грижеутворення, и особенностей анатомического строения пахового канала. В Киевском городском центре хирургии грыж живота за период с 2004 по 2009 гг. Прооперировано 3306 больных с паховыми грыжами живота в возрасте от 16 до 82 лет, преобладали мужчины - 2810 (85%). Первичные паховые грыжи диагностирован у 2810 (85%),
Витамин Олимп - дозировка, мнения, действия
СОДЕРЖАНИЕ: 1. Витамин Олимп - состав 2. Витамин Олимп - действие 3. Витамин Олимп - дозировка 4. Витамин Олимп - отзывы 5. Витамин Олимп - цена 1. Витамин Олимп - состав Комплексы витаминов и минералов польской марки Olimp являются одним из самых узнаваемых и популярных продуктов из богатого предложения этой компании. Аргументом
Анализ ДНК братья и сестры
... вопрос задать вопрос Анализ ДНК братья-сестры может определить, является предполагаемые братья и сестры биологическими. Можно выяснить наличие двух общих родителей (родные брат / сестра) или одного общего родителя (сводные брат / сестра). Участники анализа брат-сестра Обязательно: брат / сестра
«Человеческое молоко» прямо от коровы
Исследователям удалось изменить гены коровы, чтобы она могла производить молоко, благоприятное для аллергии. Грудное вскармливание не всегда возможно, и там, где у ребенка аллергия на коровье молоко (примерно в 3% случаев), замена молока может вскоре стать находкой.
Аллергия - не приговор. Современные методы диагностики и профилактики
... и (по разным данным 40-80% людей в мире) ученые называют аллергию эпидемией XXI века.Количество больных аллергией ежегодно растет, в том числе и в Украине.Самое время вспомнить, как бороться с ней, а также действительно ли эта болезнь опасна или просто создает неудобства?И главное - как вообще узнать, что у тебя аллергия? Фото: Accent Allergy & Sinus
Массовое общее лечение вен
Наши клиницисты работают вместе как многопрофильная команда по уходу. Экспертная помощь от совместной команды Mass General Vein Care включает команду сертифицированных сосудистых хирургов, интервенционных радиологов, специалистов по сосудистой медицине и зарегистрированных медсестер, которые используют инновационные подходы и новейшие технологии для оценки, диагностики и лечения пациентов с венозными заболеваниями.
Специфичные для бешенства антитела: измерение суррогатов защиты от фатальной болезни
Аннотация Антитела играют центральную роль в профилактике многих инфекционных агентов. Хотя нейтрализация является основной функцией антител, Fc- и комплемент-зависимая активность этих многофункциональных белков также может иметь решающее значение в их способности обеспечивать защиту от большинства вирусов. Защита от вирусных патогенов in vivo является сложной, и хотя нейтрализация вируса - способность антитела инактивировать инфекционность вируса, часто измеряемая in vitro, - важна,
Какими цветами украсить спальню?
... вана 11 января 2017. Полученные цветы всегда приносят много радости, но после первого восторга пришло время ответить на вопрос - что с ними делать? Лучше всего использовать их как эффектное украшение для квартиры. Мы посоветуем вам, какие виды и как вы можете украсить свою спальню. Согласованность декора Стоит помнить, что цветочная композиция призвана
Травма среднего уха
Это происходит, когда давление на обе стороны барабанной перепонки не выравнивается, что приводит к повреждению барабанной перепонки и может привести к потере ориентации под водой. Чтобы понять причину травмы, ознакомьтесь со структурой ушей: наружное ухо - состоит из наружного уха и наружного слухового прохода. Он подвергается воздействию воды, воздуха и давления. Его функция заключается в том, чтобы направлять входящие звуки на барабанную перепонку - это
VA North Texas улучшает результаты, расширяет доступ к пациенту с помощью видеомикроскопа
... ия на позвоночнике, висцеральная реакция является немедленной и вполне естественной. Позвоночник - это информационная супер-магистраль организма, и когда врачи должны прийти, чтобы починить диск или снять давление, это тонкая процедура, выполняемая в микроскопическом масштабе. Но человеческий глаз с его поистине замечательными возможностями все еще имеет свои ограничения. Чтобы смягчить любые ограничения, какими бы малыми они ни были, VA North Texas стал первым медицинским центром VA в

Комментарии

Существуют ли безопасные и проверенные методы удаления воды из организма?
Существуют ли безопасные и проверенные методы удаления воды из организма? Вот несколько способов, которые могут помочь. Ограничьте потребление натрия . Если вы чувствительны к соль обратите внимание на сумму, которую вы берете каждый день. Обратите внимание, что натрий
Препараты, предлагаемые в аптеках, дают немедленные результаты, но только кратковременные, поэтому лучше попробовать естественные методы?
Препараты, предлагаемые в аптеках, дают немедленные результаты, но только кратковременные, поэтому лучше попробовать естественные методы? Натуральные методы не только безопаснее для нашего здоровья, но и позволяют дольше и чаще наслаждаться радостью полового акта без фармакологической помощи. У источника проблемы На эрекцию влияют многие факторы - заболевание предстательной железы, кровообращение, стресс, усталость и рутина . К сожалению,
Что это за коричневый материал?
Что это за коричневый материал? Стоит ли считать этот день первым? Это коричневое вещество - старая окисленная кровь, которая не вышла из матки в прошлом цикле. Это вызвано низким уровнем прогестерона. Низкий уровень прогестерона является причиной многих проблем, связанных с менструацией. Вы также можете изо всех сил пытаться овулировать регулярно в дополнение к нечетной окраске, и у вас также могут развиться нерегулярные циклы или PCOS. Исправление FLO:
У одного из ваших пациентов была такая рефрактерная инфекция?
У одного из ваших пациентов была такая рефрактерная инфекция? Что вы должны знать, чтобы устранить их? Ответ на этот вопрос можно найти ниже. В предыдущей статье, озаглавленной «Распространенность метициллинрезистентных стафилококковых инфекций у мелких животных и людей», нарастала проблема метициллинрезистентности у золотистого стафилококка (метициллин-резистентный золотистый стафилококк - MRSA), золотистого
Я - супер поражен - у меня есть полное раскрытие?
Я - супер поражен - у меня есть полное раскрытие?!? Не то чтобы это могло быть иначе - с этими штаммами. Потом они посмотрели на меня на эхограф ... оп .... аааа, ты знаешь, что ребенок сидит? Да. Они не критиковали меня, они ничего не говорили. Я не чувствовал никакого напряжения в воздухе, и я очень рад этому. Врач (доктор Баев) очень спокойно раздавлен, а ее эму очень благодарна - я не испугалась и поэтому была спокойна. Бедра были хорошие, тоны ребенка тоже были хорошими. Это
Если вероятность низкая, каковы некоторые более вероятные результаты?
Если вероятность низкая, каковы некоторые более вероятные результаты? Эта мысль полезна? Как беспокойство об этом поможет мне и как это повредит мне? Что бы я сказал другу, который переживал это? Совет 2: различайте решаемые и неразрешимые проблемы Исследования показывают, что пока вы беспокоитесь, вы временно чувствуете меньше беспокойства. Пробежка по проблеме в вашей голове отвлекает вас от ваших эмоций и заставляет вас чувствовать, что вы чего-то
Хотите просмотреть результаты тестирования более 100 смартфонов или получить наш журнал?
Хотите просмотреть результаты тестирования более 100 смартфонов или получить наш журнал? Встретиться бесплатно с Ассоциацией потребителей. Читать подробнее: Что такое Huawei P8 Lite? Huawei P8 Lite имеет 5-дюймовый экран. Он не является экраном Full HD. Аккумулятор не заменяется
Но гарантируют ли традиционные методы очистки такой эффект?
Но гарантируют ли традиционные методы очистки такой эффект? Действительно ли он чист и свободен от бактерий, паразитов и остатков моющих средств после мытья пола шваброй и чистящим средством? Даст ли наша тяжелая работа и весь арсенал химикатов действительно удовлетворительный эффект? Обычные методы не только трудоемки и трудоемки, но и не очень эффективны. Клещи слишком малы, поэтому обычная уборка пылесосом переносит их и их помет с места на место, когда из пылесоса выдувается воздух.
Достаточно ли у Chromebook хранилища (или скорости?) Для работы с Minecraft?
Достаточно ли у Chromebook хранилища (или скорости?) Для работы с Minecraft? Если нет, то стоит ли искать ноутбук определенного размера? Благодарю. —П на Хорошей новостью является то, что вы можете играть в мобильную версию Minecraft на Kindle Fire , так что, да, я уверен, что ваш средний Chromebook достаточно мощный. Плохая новость в том, что власть не проблема. Chromebook работает под управлением
Хотите быть в курсе интересной информации дня?
Хотите быть в курсе интересной информации дня? Поставьте нам лайк на фейсбуке! Читайте о том, что важно для вас. Присоединяйся к нам. включать Мы представим вам то, что вы не видите больше нигде. Мы также дадим вам то, что другие сайты не дадут вам! Наше преимущество - стремиться
Каковы методы лечения синдрома запястного канала?
Каковы методы лечения синдрома запястного канала? Метод лечения подбирается в зависимости от длительности и степени тяжести заболевания. Местные глюкокортикостероиды используются, а иногда и перорально. При отсутствии улучшения проводится хирургическое лечение, которое является единственным методом, позволяющим полное излечение, поскольку оно устраняет причину изменений, то есть давление, оказываемое на срединный нерв. Можно ли полностью вылечить синдром запястного канала?

Самое время вспомнить, как бороться с ней, а также действительно ли эта болезнь опасна или просто создает неудобства?
И главное - как вообще узнать, что у тебя аллергия?
2017. Полученные цветы всегда приносят много радости, но после первого восторга пришло время ответить на вопрос - что с ними делать?
Существуют ли безопасные и проверенные методы удаления воды из организма?
Препараты, предлагаемые в аптеках, дают немедленные результаты, но только кратковременные, поэтому лучше попробовать естественные методы?
Что это за коричневый материал?
Стоит ли считать этот день первым?
У одного из ваших пациентов была такая рефрактерная инфекция?
Что вы должны знать, чтобы устранить их?
Я - супер поражен - у меня есть полное раскрытие?